
保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
英文名称: CF 680 CTB,CF 680 Cholera Toxin Subunit B
中文名称:CF 680 标记的霍乱毒素B亚基
溶解性:可溶于水,也能溶解于部分有机溶剂
规格:10mg、25mg、50mg
纯度:95%+
品牌信息:陕西新研博美
二、功能结构与组成展开剩余81%CF 680标记的霍乱毒素B亚基是一种重组蛋白与荧光染料的共价偶联物。它利用CTB对细胞膜GM1神经节苷脂的高亲和力,结合CF680染料的远红外荧光特性,常用于研究细胞膜结构、脂筏分布以及神经元的逆行/顺行运输与环路追踪。
结构组成特点
蛋白组分:重组霍乱毒素B亚基(rCTB)通常呈五聚体结构(5个11 kDa亚基),形成一个中心有孔的环状结构。它特异性结合细胞膜上的GM1神经节苷脂,是一种稳定的脂筏标志物。
荧光标记:CF680是一种近红外荧光染料(Exc 680 nm, Em 701 nm),具有穿透深组织的能力,荧光寿命长、光漂白率低。CF680分子通过酰胺键或巯基与CTB表面的赖氨酸残基或特定突变位点共价结合,通常标记率为1:1或1:2,不影响CTB的结构与结合能力。
化学特性:该试剂化学稳定性好(耐酸碱,pH 4-10),水溶性佳,通常以冻干粉形式保存,使用前需在无菌水或PBS中溶解并复性。
功能特性
高特异性结合:利用CTB对GM1的特异性结合,精确定位富含GM1的细胞膜微区或细胞。
逆行/顺行运输:CTB被细胞摄取后,不仅能逆行运输到达细胞体(适用于神经示踪),也能顺行运输至突触末梢(适用于研究神经通路)。
多通道兼容:CF680的近红外发射波长使其能够与常见的绿色、红色荧光探针(如FITC、Alexa 555)共用一个激光源或光源系统,实现多重标记共定位分析。
三、高特异性结合如何保证?CF 680 CTB 的高特异性(即只结合 GM1,不与其他糖脂/蛋白交叉反应)通过以下多层次机制保障:
1. CTB 天然的分子识别机制
CTB 与 GM1 的结合是高度结构特异性的锁钥模型:
识别 GM1 的 五糖头基(Galβ1-3GalNAcβ1-4[Neu5Acα2-3]Galβ1-4Glcβ1-1'Cer)
对 GM2、GD1a 等其他神经节苷脂亲和力低 >1000 倍
五聚体结构提供 “多价效应”(avidity effect),显著增强结合稳定性与特异性
2. 偶联工艺不破坏结合域
染料偶联位点经过理性设计或经验筛选,确保:
不修饰 GM1 结合口袋附近的氨基酸(如 Gly33, Lys91, Glu51 等关键残基)
蛋白二级/三级结构完整保留
功能验证:每批次产品均通过 GM1-ELISA 或细胞结合实验 验证活性保留率 ≥90%
四、关联试剂Methyltetrazine-Sulfo-NHS ester
Tetrazine-Sulfo-NHS ester
Methyltetrazine-PEG4-NHS ester
Methyltetrazine-PEG5-NHS ester
Methyltetrazine-PEG8-NHS ester
Sulfo-Cyanine7.5 carboxylic acid
Sulfo-Cyanine5.5 dUTP
Sulfo-Cyanine5 tetrazine
Sulfo-Cyanine5 DBCO
Cyanine3.5 azide
Sulfo-Cyanine7 amine
DBCO-Disulfo-Cyanine3
Sulfo-Cyanine3-hydrazide
Tide Quencher 5 CPG 1000
(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)
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